Poder antioxidante cómo medir


Con el fin de mantener un equilibrio adecuado entre los radicales libres y los sistemas antioxidantes y importante para proporcionar de forma coherente el cuerpo una adecuada ingesta de polifenoles, vitaminas, carotenoides y muchas otras sustancias. Estos compuestos son capaces de reaccionar con los radicales libres, lo que reduce la reactividad y la generación de moléculas menos peligrosas eliminan fácilmente del cuerpo.
Es importante tener en cuenta también que los antioxidantes actúan por mecanismos diferentes y con diferentes eficiencias en función del tipo de radical implicada en la reacción. Cada antioxidante, de hecho, y capaz de ejercer su acción de contraste en unos pocos radicales específicos, para lo cual es necesario que la ingesta de antioxidantes exógenos es la más variada posible, de modo que las diferentes moléculas pueden actuar de manera complementaria o en sinergia en la protección de las biomoléculas oxidación operado por especies radicales de diferente naturaleza.
En este sentido, se concentra en el foco de la investigación en la profundización de los mecanismos por los que los antioxidantes protegen a las células. En particular, es de gran importancia para la posibilidad de medir la cantidad de antioxidantes en la dieta o la eficacia de la barrera antioxidante, con el fin de corregir cualquier situación de riesgo en una forma dirigida.
La principal dificultad en medir la eficacia de una sustancia antioxidante y debido al hecho de que las especies de radicales libres involucrados en la determinación del estrés oxidativo son numerosas y reaccionan con biomoléculas con velocidad y diferentes mecanismos. Debido a la diferente naturaleza de los radicales libres, y extremadamente difícil identificar un método de análisis que permite medir de forma inequívoca la capacidad de un compuesto para contrarrestar la acción oxidante de las especies reactivas, especialmente cuando se tiene que ver con matrices complejas, tales como extractos de sangre, alimentos o planta. Los radicales libres, de hecho, difieren en reactividad, para el tipo de la biomolécula diana, para la matriz biológica en la que actúan y la afinidad para el (entorno hidrófilo o lipófilo) químico-física, así como el mecanismo por el que se generan.
Además, con el fin de comparar los datos medidos para diferentes sustancias es importante tratar de normalizar tanto como sea posible los métodos utilizados. Un método analítico ideal debe primero ser simple y fácilmente reproducible, con el fin de asegurar una buena repetibilidad de los resultados. Además, deben emplear radicales significativas desde el punto de vista de los mecanismos biológicos que reaccionan con clara y conocida, con el fin de simular tanto como sea posible in vitro lo que ocurre con el cuerpo, reduciendo así al mínimo la interferencia. Por último, un ideal ensayo debe ser versátil que le permite medir tanto hidrofílico y lipofílico.
Actualmente no existe un único método válido para medir el poder antioxidante de un compuesto, que cumple con las características descritas. Por tanto, debe recurrir a la combinación de los resultados de más pruebas basadas en diferentes mecanismos y de las especies de radicales, con el fin de llegar a un compromiso, que también tiene en cuenta el uso final de los propios resultados.
Determine lo que quiere medir y porque no es sólo importante para la elección de los métodos más adecuados de medición, sino también para el uso del protocolo de extracción más adecuado, ya que los antioxidantes representan una amplia familia de compuestos con características físico-químicas muy diferentes y no hay ninguna técnica de extracción capaz de extraer todos los antioxidantes presentes en una matriz compleja, al mismo tiempo reducir al mínimo la presencia de interferentes potenciales que pueden distorsionar los resultados.

MÉTODOS DE ANÁLISIS

La forma más directa para evaluar la capacidad de un compuesto para proteger a las células y tejidos del estrés oxidativo y medir la capacidad antioxidante de la sangre después de tomar el compuesto en sí, es decir, la eficacia en el fortalecimiento de la barrera antioxidante, que incluye el conjunto de antioxidantes en la sangre. La prueba elaborada típicamente tienen características muy específicas y son capaces de medir la acción de un determinado tipo de antioxidante en condiciones bien definidas. Sin embargo, los diferentes antioxidantes en la sangre no actúan por separado, pero ejercen una estrechamente interconectados para crear una sinergia que se consigue una protección óptima contra el ataque de los radicales libres. Por lo tanto, la medida real de la capacidad antioxidante total no puede ser reducido a la simple suma de la capacidad antioxidante de los componentes individuales, y es imposible para determinar la acción global de los sistemas antioxidantes en fluidos biológicos por un solo ensayo.
Una alternativa es medir la actividad antioxidante in vitro de sustancias exógenas que son absorbidos con la dieta (alimentos y suplementos). En este caso, sin embargo, hay que tener en cuenta que esta es una medida del potencial antioxidante de un compuesto, que sólo proporciona una aproximación de su capacidad de ejercer una acción protectora en compartimentos biológicos reales contra la agresión de los radicales libres, ya moneda cuantitativamente antioxidantes presentes, pero no ninguna información sobre su biodisponibilidad y la eficacia cuando se introduce en el cuerpo.
Los métodos para la medición de la capacidad antioxidante se pueden dividir en dos categorías basadas en el mecanismo por el que reaccionan con radicales libres para inactivar la reactividad:

  • métodos HAT (Atom Transfer hidrógeno), que se basa en la capacidad de una sustancia para ejercer su acción antioxidante a través de la venta de un átomo de hidrógeno a las especies de radicales;
  • métodos set (Single transferencia de electrones), que evalúan la capacidad de una sustancia para reducir los radicales libres a través de la transferencia de electrones.

Algunos de los métodos analíticos empleados son capaces de actuar con ambos mecanismos.
Basado en lo anterior, es evidente que el número de ensayos procesados ​​para la determinación de la capacidad antioxidante y antirradical y muy alta, para la que en lo sucesivo nos limitaremos a ilustrar brevemente el más común y significativo, tratando de poner de relieve las ventajas y limitaciones .